差速離心分離法與分離效果
2009-05-21
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差速離心比較簡(jiǎn)單，離心過(guò)程中將懸混液分離成沉淀與上清液兩部分，通過(guò)倒出上清液或刮出沉淀，除去較小或較大的顆粒雜質(zhì)，達(dá)到分離提取的目的。該方法多使用角轉(zhuǎn)子，離心分離的時(shí)間短，低速一般不超過(guò)0.5h，高速不超過(guò)3~4h。離心計(jì)算設(shè)計(jì)方便，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好。
差速離心分辨能力較差，一般不能獲得理想純度，沉淀不能達(dá)回收。
對(duì)于有活性料，需要認(rèn)真選擇RCF與離心時(shí)間，否則受過(guò)大離心力的壓力作用，有些顆粒受擠壓而變形甚至破裂失去活性。生物顆粒表面由于一些大分子等以三級(jí)結(jié)構(gòu)相互接觸，緊緊擠壓在一起，形成不可逆的氫鍵結(jié)合、粘黏，使原有活性消失或減退，形成廢品餅子，所以形成沉淀的離心力絕不是越大越好。
差速離心中樣品的產(chǎn)率與純度是矛盾的，要求純度高、產(chǎn)率就會(huì)低。
顆粒大小和密度對(duì)沉降的影響。溶劑介質(zhì)中顆粒沉降速度由r2p （ρp-ρm）決定。影響沉降的因素是顆粒大小與溶劑介質(zhì)的密度。例如密度ρ大的小顆粒可能與密度ρ小的大顆粒有相似的S值。對(duì)這類(lèi)顆粒就還要用密度梯度法進(jìn)一步分離提純化。
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